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空间转录组测序

10x Visium

10x Genomics Visium将基因空间表达可视化,在识别差异细胞群的同时保留空间配景,提供了关于组织微情形中细胞功效、表型和位置关系的关jian信息,为基因表达和组织重大性研究提供了一个新视角。

将冰冻组织切片放置在10X Genomics Visium芯片的的捕捉区域内,举行HE染色和成像后,对组织切片举行透化处置赏罚,细胞内的mRNA释放,从而被芯片上带有oligo-dT的探针捕捉,而且每个探针都带有特异的地址序列,然后以mRNA为模版举行cDNA合成,构建文库后举行测序,从而能够获得基因表达的位置信息。
 
Visium空间基因表达玻片信息

Visium芯片有4个捕捉区域,每个区域巨细为6.5mm *6.5mm,每个spot直径为55um,包罗数百万个用于捕捉的oligo探针序列,相邻两个spot点的中心距离为100um。探针序列的结构为:测序引物团结序列,16 nt spatial barcoded,12 nt UMI及30 nt oligo-dT序列。
 
 
样本起shi量与送样建议

组织类型 样本网络
OCT包埋冰冻组织/白片/切片 制备 OCT包埋冰冻组织块,建议组织巨细为长×宽不凌驾 6.5mm×6.5mm,高度≥5mm;
白片或贴片建议准备6-13 片(10μm 厚度)。
封装好用干冰举行寄送。
FFPE包埋组织/白片/切片 石蜡包埋组织封装好后,4℃举行寄送。
石蜡包埋白片或贴片建议准备6-13 片(5μm 厚度),4℃举行寄送。
 
注重事项:详细样本准备指南,请联系在线客服。
 
生物信息学剖析内容

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