病毒载体构建服务包罗慢病毒、腺相关病毒、腺病毒和逆转录病毒载体等,构建内容包罗基因过表达载体构建、基因定点突变表达载体构建、用于基因默然沉静的shRNA设计与构建、microRNA表达与关闭载体设计与构建、萤光素酶陈诉基因载体构建(UTR、启动子及其它功效序列)以及Cre-LoxP系统和CRISPR/Cas9基因编辑工具载体设计与构建等,力争一站式解决基因功效研究中的基因上协调基因下调需求。
质粒优势:
、俦泶锸奔淇,导入细胞后约24小时可视察到目的基因表达;
、诠菇ㄊ忠占蚱,成本低。
、叟繁Φ墓泶镌靥蹇飧缓,而且过表达的标志富厚
荧光标志:GFP、mCherry、CFP、BFP、EYFP、mNeonGreen、tdTomato、 mScarlet…
标签标志: FLAG、 HA 、Myc、His tag…
抗衴uan昙:Puro、Neo、Hygro、BSD…
局限性:
、僮臼约辆哂邢赴拘裕褂煤笥跋煜赴刺
、诖蟛棵畔赴夏炎,达不到基因操作目的;
、壑柿2徽系较赴蜃,只能举行短时间的瞬时表达,无法举行视察周期较长的实验。
由于单纯质粒存在一定的局限性,凭证实验需要需包成病毒进一步知足差异实验的需求。
差异表达载体的区别
表达系统 |
真核表达载体 |
慢病毒载体 |
重组腺相关病毒载体 |
重组腺病毒载体 |
载体基因特征 |
双链DNA质粒 |
RNA逆转录病毒 |
单链DNA病毒 |
双链DNA病毒 |
外源基因表达时间 |
24h开shi表达,一连3-7天 |
2-4天开shi表达,长时间稳固表达 |
7-14天开shi表达 |
1-2天开shi表达 |
插入片断巨细 |
8kb左右 |
4kb左右 |
2.8kb左右 |
6kb左右 |
稳固细胞株筛选 |
难操作 |
可以 |
不行以 |
不行以,瞬时表达 |
细胞实验 |
细胞系,部门转染效率低 |
首选,广谱,熏染效率高 |
不适合 |
广谱,熏染效率高 |
动物实验 |
不适合 |
适合,凭证视察时间和注射部位 |
首。局な硬焓奔浜妥⑸洳课 |
免疫原性高,慎选 |
滴度规模 |
无 |
108~109TU/ml |
1012-1013vg/ml |
1010-1011pfu/ml |